分子生物學(xué)在目前醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域算是前沿科技，而PCR檢測(cè)技術(shù)是其中之一，在臨床醫(yī)學(xué)應(yīng)用比較廣泛。pcr檢測(cè)技術(shù)主要用于對(duì)基因序列的分析，檢測(cè)腫瘤、癌細(xì)胞和遺傳病等發(fā)生過(guò)程,它可以在短時(shí)間之內(nèi)檢測(cè)到突變基因，對(duì)于復(fù)雜的基因組織也有跡可循，而且易于和其它基因檢測(cè)手段結(jié)合使用，所以在醫(yī)學(xué)研究應(yīng)用領(lǐng)域受到廣泛應(yīng)用。這些實(shí)驗(yàn)都需要在特定的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，就是本文所講的PCR實(shí)驗(yàn)室，如果你有PCR實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目，歡迎咨詢康合公司，行業(yè)知名專家和您面對(duì)面溝通。
       1.什么是pcr實(shí)驗(yàn)室
       2.PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)依據(jù)
       3.PCR實(shí)驗(yàn)室布局及主要設(shè)備
       4.PCR實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃設(shè)計(jì)要點(diǎn)
       5.PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓差控制
       6.PCR實(shí)驗(yàn)室污染的預(yù)防和控制
 
一、什么是PCR實(shí)驗(yàn)室
       PCR實(shí)驗(yàn)室另一個(gè)專業(yè)名稱是基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱就是PCR,它是一種分子生物學(xué)技術(shù)，可以將特定的DNA片段放大，可看成生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng)，快速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精準(zhǔn)程度達(dá)到納米級(jí)別。
       PCR應(yīng)用在生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，如檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病，癌基因的檢測(cè)和診斷，DNA指紋、個(gè)體識(shí)別、親子鑒別及法醫(yī)物證，動(dòng)、植物檢疫，動(dòng)物及其衍生產(chǎn)品檢測(cè)，轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測(cè)等；舉個(gè)通俗易懂的例子，通過(guò)PCR技術(shù)可以精確檢測(cè)乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復(fù)制、是否傳染、傳染性有多強(qiáng)、是否要服藥、肝功能有否異常改變能及時(shí)判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗(yàn)依據(jù)。

 
二、PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)依據(jù)
       《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增管理法》（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)2010-194號(hào)）
       《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》GB50346-2004
       《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》GB50073-2001
       《高效空氣過(guò)濾器》GB13554-92
       《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489-2004
       《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》WS233-2002中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部
三、PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局
       PCR實(shí)驗(yàn)室原則上需要分為四個(gè)區(qū)域，進(jìn)入各工作區(qū)一定按照單一方向進(jìn)行，而且不同的區(qū)域要穿不同的工作服，比如不同顏色。謹(jǐn)記：工作人員離開(kāi)各工作區(qū)域時(shí)，不能將工作服帶出。各工作區(qū)域必須有明確的標(biāo)記，避免不同工作區(qū)域內(nèi)設(shè)備、物品混用。
       PCR實(shí)驗(yàn)室四個(gè)區(qū)域、功能及配備設(shè)備分別為：
       1.試劑配制區(qū)
       功能：擴(kuò)增試劑的配置、分裝和保存；
       設(shè)備：主要有冰箱、超凈臺(tái)、加樣器、混勻器、天平和離心機(jī)等，加樣器、天平除了要專用外，還應(yīng)有定期校準(zhǔn)。試劑分裝應(yīng)在超凈臺(tái)中進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生物學(xué)級(jí)的，試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢：一是否有污染、二是檢測(cè)試劑的擴(kuò)增效果。
       2.樣品處理區(qū)
       功能：樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。
       設(shè)備：生物安全柜、加樣器、離心機(jī)、溫育儀、混勻器等
       3.核酸擴(kuò)增區(qū)
       功能：DNA擴(kuò)增; 已制備的DNA模板 (來(lái)自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。
       設(shè)備：核酸擴(kuò)增儀、超凈臺(tái)、微量加樣器、離心機(jī)、可移動(dòng)紫外燈。擴(kuò)增儀需進(jìn)行校準(zhǔn)。并配備UPS電源，以防止由于電壓的波動(dòng)，停電對(duì)擴(kuò)增效果的影響。
       4.產(chǎn)物分析區(qū)
       功能：擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定、結(jié)果分析、登記及報(bào)告。
       設(shè)備：酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等潔凈實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖間部分面積不能超過(guò)主實(shí)驗(yàn)室的八分之一,這是有規(guī)定的。        如果使用全自動(dòng)分析儀，區(qū)域可以適當(dāng)合并。
       擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)，須使用不同的房間，兩區(qū)之間最好有一定的間隔。使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進(jìn)行少量試劑配制。
       如果滿足下列要求，則樣品處理區(qū)和試劑配制區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi)：
       1.在生物安全柜內(nèi)操作；
       2.每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材；
       3.盛放污染材料的器皿密封并一次性使用；
       4.用有效的方法對(duì)操作區(qū)域和共享器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒。  
四、PCR實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃設(shè)計(jì)要點(diǎn)
       1、主體結(jié)構(gòu)
       實(shí)驗(yàn)室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過(guò)渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
       2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)
       將PCR過(guò)程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴(kuò)增檢測(cè)三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時(shí)各區(qū)通過(guò)氣壓調(diào)節(jié)，使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。
       可打開(kāi)緩沖區(qū)Ⅰ，緩沖區(qū)Ⅱ和PCR擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過(guò)回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。
       3、消毒
       在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。
       在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈，對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。
       4、機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗：試劑和標(biāo)本通過(guò)機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過(guò)程中不受污染（人物分流）。
       5、地面
       地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒(méi)有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm×800mm）接縫需要小于2mm。地面要防滑，不得鋪地毯;  
       6、照明燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。   
       在建設(shè)設(shè)計(jì)的過(guò)程中應(yīng)注意：
       （1）可共用的建筑物，應(yīng)自成一區(qū)，宜設(shè)在一側(cè)，與建筑物其他部分可以相通。將實(shí)驗(yàn)室分為三區(qū)，半污染區(qū)、污染區(qū)和潔凈區(qū);
       （2）實(shí)驗(yàn)區(qū)應(yīng)設(shè)置有非手動(dòng)洗手池;
       （3）實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)帶鎖，可自動(dòng)關(guān)閉，門要帶有可視窗;
       （4）實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)外應(yīng)有存放個(gè)人衣物的條件;
       （5）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配置生物安全柜;
       （6）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)洗眼設(shè)備，必要時(shí)有緊急噴淋裝置;
       （7）有可靠的應(yīng)急照明;
       （8）實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辨認(rèn)的標(biāo)識(shí)
       （9）安裝前需要確定以下條件，如：電源電壓，電源進(jìn)線位置，電話網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置，進(jìn)水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。
           總之，一定要嚴(yán)格遵守科學(xué)規(guī)范的流程進(jìn)行安裝建設(shè)  
五、PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓差控制
       對(duì)于PCR實(shí)驗(yàn)室而言，凈化要求并不嚴(yán)格。但是為了避免實(shí)驗(yàn)室各區(qū)交叉污染，需要采用全送全排的氣流組織形式，而且一定要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例，達(dá)到各實(shí)驗(yàn)室的壓力要求。下面來(lái)看看各個(gè)分區(qū)對(duì)壓力的要求
       1.試劑配制區(qū) ：本區(qū)對(duì)氣流壓力的控制沒(méi)有嚴(yán)格的要求。
       2.樣品處理區(qū)：本區(qū)的要求為相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。
       3.核酸擴(kuò)增區(qū)：本區(qū)相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少不必要的走動(dòng)。加樣等操作應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
       4.產(chǎn)物分析區(qū)：本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源，本區(qū)相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。  
六、PCR實(shí)驗(yàn)室污染的預(yù)防和控制
       如何避免污染是PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問(wèn)題。常見(jiàn)的污染類型主要有以下幾種類型：
       擴(kuò)增產(chǎn)物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑的污染以及標(biāo)本間的污染。
       一旦發(fā)生污染，實(shí)驗(yàn)就必須停止，直到找到污染源為止，而且必須作廢實(shí)驗(yàn)結(jié)果，需要重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。這時(shí)候?qū)ふ椅廴驹春臅r(shí)繁瑣，浪費(fèi)人力物力。因此避免污染，首要的是預(yù)防，而不是排除。
       如何嚴(yán)格管理PCR實(shí)驗(yàn)室呢，必須注意以下幾點(diǎn)：
       （1）嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人員。與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室，有條件的情況下要設(shè)置獨(dú)立的通道和進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的門；
       （2）減少實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)，進(jìn)而降低交叉污染的可能性。
       （3）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源，一定不能在實(shí)驗(yàn)室中傾倒廢液，必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離pcr實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉，用過(guò)的一次性材料如吸頭等也必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理，如焚燒等；
       （4）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，一定要對(duì)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行特殊的安全防護(hù)。  
       廣州康合實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司從以上六個(gè)方面詳細(xì)介紹了PCR實(shí)驗(yàn)室；康合是國(guó)內(nèi)專業(yè)的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)公司，如果您需要PCR實(shí)驗(yàn)室裝修設(shè)計(jì)或者是新建PCR實(shí)驗(yàn)室，亦或?qū)CR實(shí)驗(yàn)室有任何疑問(wèn)，歡迎咨詢康合，我們會(huì)有專業(yè)的技術(shù)人員和您面對(duì)面溝通。